全自动生化分析仪原理
发布时间:2013/4/4 点击:474 字体大小:小 中 大 返回
全自动生化分析仪原理 生化分析仪是临床检验中经常使用的重要分析仪器之一,它通过对血液或者 其他体液的分析来测定各种生化指标: 如转氨酶、血红蛋白、白蛋白、总蛋白、 胆固醇、肌肝、葡萄糖、无机磷、淀粉酶、钙等。结合其他临床资料,进行综合 分析,可以帮助诊断疾病,对器官功能做出评价,鉴别并发因子,以及决定今后 治疗的基准等。 全自动生化分析仪是一种全自动的临床检验仪器。它是一种集光学,电子, 自动化控制为一体的体外诊断仪器,与适配的试剂组合使用,该仪器主要用于定 量测定人源血清,血浆,尿液,脑脊液等的临床生化,临床免疫,治疗性药物浓 度及药物滥用等项目。随着我国人民生活水平和医疗卫生水平的不断提高,分析 仪的使用日益普及,已经成为各级医院不可或缺的设备之一。 原理: 全自动生化分析仪属于光学式分析仪器,它基于物质对光的选择性吸收,即 分光光度法。单色器将光源发出的复色光分成单色光,特定波长的单色光通过盛 有样品溶液的比色池,光电转换器将透射光转换为电信号后送入信号处理系统进 行分析。 分光光度法是基于不同分子结构的物质对电磁辐射的选择性吸收而建立起 来的方法,属于分子吸收光谱分析。当光通过溶液时,被测物质分子吸收某一波 长的单色光,被吸收的光强度与光通过的距离成正比。虽然现在了解到 Bouguer 早在 1729 年已提出上述关系的数学表达式,但通常认为 Lambert 于 1760 年最早 发现表达式,其数学形式为: T=I/I0=e-kb 其中 I0 为入射光强,I 为透射光强,e 为自然对数的底,k 为 常数,b 为光程长度(通常以 cm 表示)。 比尔定律等同于 Bouguer 定律,只是比 尔定律以浓度来表达。将两个定律结合起来,组成 Beer-Bouguer 定律: T=I/I0=e-kbc 其中 c 为吸光物质的浓度(通常以 g/L 或 mg/L 为单位)。将上式取 以 10 为底的对数后,得到线性表达式: A=-logT=-log(I/I0)=log(I0/I)=εbc 其 中 A 为吸光度,ε 是摩尔吸收光系数或消光系数。 上述表达式通常称为比尔定律。它表明,当特定波长的单色光通过溶液时, 样品的吸光度与溶液中吸收物浓度和光通过的距离成正比。 在波长、溶液和温度确定的情况下,摩尔消光系数是由给定物质的特性决定 的。实际上,测得的摩尔消光系数也和使用的仪器有关。因此,在定量分析中, 通常并不用已知物质的摩尔消光系数,而是用一个或多个已知浓度的待测物质作 一条校准或工作曲线。 由于电子跃迁在基态和激发态之间能量差别较大,因此,室温下几乎所有分 子的电子都处于基态。吸收光及返回基态的速度非常快,平衡迅速实现,这使得 光吸收的定量准确性相当高。根据工作波段的不同,分光光度法可分为真空—紫 外、可见光、紫外—可见和紫外—可见—近红外,其工作波段分别为 0.1nm~200nm、350nm~700nm、185nm~900nm 和 185nm~2500nm。作为临床生化分析 使用,一般要求工作波长为 340nm~800nm,属于紫外—可见分光光度法。吸光度 与浓度之间简单的线性关系及紫外—可见光相对容易测量,使得紫外—可见分光光度法成为上千种定量分析方法的基础。
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