几种全自动生化分析仪交叉污染的探讨及避免方法
新成生物 郑明
全自动生化分析仪具有微量、快速、准确、重复性好等特点。随着全自动生化分析仪的广泛应用,其测定过程中存在的交叉污染问题也受到关注。分析仪使用同一试剂针吸取试剂,虽然分析仪有清洗系统,但试剂针很难通过一次短暂快速的清洗程序清洗干净,一个项目对随后的一个项目甚至几个项目都会带来一定程度的试剂交叉污染,并且随着仪器使用时间的增加,试剂交叉污染程度会有所加剧。
根据我们观察后发现,各种不同品牌的全自动生化分析仪都存在一定的交叉污染。对于清洗状态好的仪器,比色杯之间的交叉污染影响较小,需要浸泡或更换比色杯,即可排除,临床可以接受。当仪器老化或清洗系统状态不好时,往往比色杯带来的交叉污染最严重,也最不好排除。样品针间的交叉污染影响较小,造成样品针之间的交叉污染可忽略。试剂针及搅拌棒带来的交叉污染则对临床带来最大影响,携带污染率最高可达3000%。试剂针的交叉污染可以通过重新设置通道,调整试剂加样顺序而避开[1]。或者利用仪器的特殊清洗程序来增加清洗而消除这种交叉污染,但这样会导致测试速度减慢,所以医院都不愿意采用此方法,而选择调整试剂加样顺序避免。但污染与被污染试剂之间到底该隔几个通道,才能有效避免这种交叉污染呢?通过观察得知,各类全自动生化分析仪为避免交叉污染而需要间隔试剂的个数不定,但至少都需要间隔一个试剂位置。由于每款仪器性能不同,而不同医院使用情况又不一样,故实验室出现试剂间的交叉污染时,最好自己来做相关实验,以得到准确的数据,从而得到直接的证据,重新设置通道,避免此类现象的发生。我们分析可能的污染来源及解决方法如下:
一、生化仪部件间化学污染的来源:
1. 试剂针污染:目前大多数全自动生化分析仪采用双试剂检测样本,试剂R1、R2的吸取与吐出,一般分别只配有一套试剂针。当试剂针在清洗不完全,或黏附力增加时,残留试剂可能会对下一相邻检测结果造成影响。
2. 搅拌棒污染:在试剂与样本混合后,往往需要搅拌棒加以混匀,而搅拌棒若清洗不完全,或黏附力增加时,残留试剂可能会对下一相邻检测结果造成影响。
3. 比色杯污染:生化分析仪的比色杯一般是循环使用的,每个比色杯检测完毕后,进行清洗,然后继续下一个检测项目。当某个比色杯清洗不完全时,吸附在比色杯上的上一个项目的残留试剂,可能会对在这个比色杯中进行的下一个项目的检测结果造成影响。
以上3种可能的污染,以比色杯污染最为严重,因为比色杯最难以清洗干净,且在实际工作中难以判断该比色杯上一测试的项目。试剂针吸量较大,亦难以清洗干净。
二、消除试剂间化学污染的方法:
1. 要求检验人员对仪器工作流程、试剂组成、测定原理要了如指掌,对试剂交叉污染的各种可能性加以考虑,合理设计程序。更换试剂时,应仔细研究说明书,发现和避免可能存在的试剂交叉污染。
2. 当发现有交叉污染时,应对仪器进行保养,如更换比色杯、管道,用无水乙醇擦洗试剂针和搅拌棒,检查清洗装置及效果等。
3. 合理安排检测项目的顺序,在有交叉污染的检测项目中插入一个或两个非污染项目。最彻底的做法则是将被干扰项目置于干扰项目之前,以消除干扰发生的可能。由于各厂商试剂盒原理不同,内含成分不同,故无固定的测定顺序格式,需要自己摸索。一般检测顺序有以下原则:①不受上一试剂的干扰;②不影响下一试剂测定;③不影响测试速度;④充分运用剩余试剂位开展新项目;⑤利用好仪器的功能。
4. 当合理设置测试顺序无法消除交叉污染时,可使用生化分析仪的试剂针、比色杯清洗程序,对试剂针、比色杯进行2次或多次清洗。用碱性清洗液及酸性清洗液冲洗试剂针可以有效地避免携带污染。
5. 选用具有抗交叉污染的试剂盒:如在游离胆固醇试剂中添加胆固醇酯酶抑制剂,以减少胆固醇酯酶水解胆固醇酯而引起对游离胆固醇测定的污染。
综上所述,了解不同仪器之间交叉污染的程度,并采取必要的预防措施,可有效避免因仪器交叉污染带来的结果影响。